IPEC-J2細(xì)胞(豬小腸上皮細(xì)胞)

細(xì)胞特性

1）來(lái)源：豬小腸

2）形態(tài)：上皮型，貼壁生長(zhǎng)

3）含量：>1x106個(gè)/T25方瓶或1mL凍存管

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞接受后的處理：

1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。3）可以將T25方瓶中的**培養(yǎng)液回收至2個(gè)50mL離心管中后續(xù)培養(yǎng)此細(xì)胞繼續(xù)使用。4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。

5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，89%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二、細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要**凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入5mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。**天換液并檢查細(xì)胞密度。因?yàn)榇渭?xì)胞對(duì)DMSO比較敏感，所以復(fù)蘇次細(xì)胞時(shí)必須離心**去除DMSO。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

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